Analisatore di tossine da muffe ST-2000A Contenuto di aflatossina B1 Intervallo di lunghezza d'onda 400-900nm Ripetibilità ≤0,3%

ST-2000A Esame delle micotossine

L'analizzatore di micotossine ST-2000A è uno strumento analitico necessario per l'analisi dell'immunosorbente legato alle aflatossine e agli enzimi.vale a dire l'analisi immunosorbente legata agli enzimi (ELISA), è composto da questo strumento e dal kit B1,che può essere utilizzato per determinare il contenuto di aflatossina B1 e di altre micotossine nei campioni in modo limitato e quantitativo (se dotato di altri kit)È ampiamente utilizzato per la rilevazione dell'aflatoxina B1 e di altre micotossine negli alimenti, nei mangimi, negli oli, nei latticini, nei farmaci, nelle bevande, nel vino e in altri prodotti.

Caratteristiche di prestazione:

1- Display operation: schermo LCD a colori, scheda di distribuzione per videofono, scheda di visualizzazione di tutte le informazioni, touch screen operation

2Funzione della piastra vibrante: velocità della piastra vibrante di livello 3, tempo regolabile da 0 a 255 secondi

3Stazione di lavoro: software di marcatore enzimatico professionale, in grado di memorizzare 500 gruppi di programmi, 100000 risultati di campionamento e fornire ricche modalità di calcolo come assorbimento, equazione lineare,equazione logaritmica, equazione quadratica, equazione cubica, equazione logaritmica percentuale di assorbimento-concentrazione, funzione spline, tasso di inibizione, ecc.

Parametri tecnici:

Fonte luminosa: lampada ad alogeno importata DC12V 22W

Intervallo di lunghezza d'onda: 400-900 nm

Filtro: 405, 450, 492, 630nm come standard, altre lunghezze d'onda opzionali

Intervallo di lettura: 0-4.000Abs

Risoluzione: 0.001Abs

Errore di indicazione: ≤ ± 0,01Abs

Stabilità: ≤ ± 0,003Abs

Ripetibilità: ≤ 0,3%

Dimensione: 400 mm * 260 mm * 200 mm

1 Principio e applicazione

Questo kit utilizza il metodo ELISA indiretto competitivo per rilevare l'aflatoxina B1 (AFB1) nei cereali, nei mangimi e in altri campioni.indicatore dell'enzima del rafano, anticorpi, reagenti standard e altri reagenti di corrispondenza.l'aflatoxina B1 nel campione e la piastra enzimatica sono pre-rivestiti con l'antigene coniugato per competere per l'anticorpo anti-aflatoxina B1. Dopo aver aggiunto il marcatore enzimatico, utilizzare il substrato TMB per sviluppare il colore. Il valore di assorbimento del campione è negativamente correlato al contenuto di aflatossina B1 contenuto nel campione.La quantità residua di aflatossina B1 nel campione può essere ottenuta confrontandola con la curva standard.

2 Indicatori tecnici

2.1 Sensibilità del kit: 0,03ppb (ng/ml)

2.2 Modalità di reazione: 25 °C, 30 min~15 min.

2.3 Limite inferiore di rilevamento:

Cereali 0,15 pppb

Forma alimentare per animali

Olio commestibile, arachidi 0,6 pppb

Salsa di soia, grano e altri mangimi

Birra 0,3 ppb

Vino, salsa di soia, aceto

2.4 Velocità di reazione incrociata:

Aflatoxina B1 100%

2.5 Tasso di recupero dei campioni:

Cereali e mangimi per la preparazione alimentare 85% ± 15%

Arachidi: 82 ± 15%

Olio commestibile 85 ± 15%

Salsa di soia, grano e altri mangimi 83 ± 15%

Birra 84 ± 15%

Vino, salsa di soia, aceto............ 87 ± 15%

3 Composizione del kit

Placca di marcatore enzimatico 96 fori

Soluzione standard (coperchio nero): 1 ml ciascuno

0ppb,00,03 pppb,00,06 pppb,00,12 pppb,00,24 pppb,0.48ppb

Soluzione standard elevata: 100ppb 1ml

Marcatore enzimatico (cappuccio rosso) 5,5 ml

Soluzione di lavoro di anticorpi (cappuccio blu)

Soluzione di substrato A (cappuccio bianco) 6 ml

Substrato liquido B (coperchio nero) 6 ml

Soluzione di terminazione (tapo giallo) 6 ml

20X soluzione di lavaggio concentrata (coperchio bianco)

Manuale d'uso 1 copia

4 Attrezzature e reagenti necessari

4.1 Apparecchi: misuratore di aflatossine, stampante, omogeneizzatore, apparecchio di asciugatura dell'azoto, oscillatore, centrifuga, pipetta graduata, bilancia (sensibilità 0,01 g)

4.2 Micropipette: monocanale 20 μl-200 μl, 100 μl-1000 μl, multicanale 300 μl

4.3 Reagente: metanolo, n-esano, triclorometano o diclorometano

5 Pretrattamento del campione

5.1 Istruzioni prima del trattamento dei campioni:

L'apparecchio sperimentale deve essere pulito e utilizzare una testa di aspirazione usa e getta per evitare contaminazioni e interferenze con i risultati sperimentali.

5.2 Preparazione della soluzione:

Soluzione 1: estratto di campione

70% di metanolo, vale a dire V metanolo: V acqua deionizzata=7:3.

5.3 Passi di pretrattamento del campione:

5.3.1 Metodo di trasformazione dei cereali

1) Pesare 2 g di campione schiacciato in un tubo centrifugo da 50 ml, aggiungere 5 ml di soluzione di estrazione del campione, agitare per 5 minuti, a 4000 giri al minuto a temperatura ambiente/10 minuti di centro di separazione;

2) Prendere 0,5 ml di supernatante, aggiungere 0,5 ml di acqua deionizzata e mescolare bene;

3) Prendere 50 μl di analisi.

Rapporto di diluizione del campione: 5 Limite inferiore di rilevazione: 0,15 pppb

5.3.2 Metodi di lavorazione per campioni con forte assorbimento dell'acqua, quali guscio di mais e crusca di grano

1) Pesare 2 g di campione schiacciato in un tubo centrifugo da 50 ml, aggiungere 20 ml di soluzione di estrazione del campione, agitare per 5 minuti, a 4000 giri al minuto a temperatura ambiente/10 minuti di centro di separazione;

2) Prendere 0,5 ml di supernatante, aggiungere 0,5 ml di acqua deionizzata e mescolare bene; (Per il campione con un contenuto di tossine estremamente elevato, può essere diluito con il 35% di metanolo e quindi testato.1 ml della soluzione mista in 2) e 0.9 ml di metanolo al 35% da mescolare.

3) Prendere 50 μl di analisi.

Rapporto di diluizione del campione: 20 Limite inferiore di rilevazione: 0,6 pppb

Nota: poiché la distribuzione della tossina nel campione è irregolare, è necessario prelevare campioni da più punti e mescolarli completamente prima di prelevare 2 g per il test.

5.3.3 Metodo di trasformazione dei mangimi per la formula

1) Pesare 2 g di campione schiacciato in un tubo centrifugo da 50 ml, aggiungere 10 ml di soluzione di estrazione del campione, agitare per 5 minuti, a 4000 giri al minuto a temperatura ambiente/10 minuti di centro di separazione;

2) Prendere 0,5 ml di supernatante, aggiungere 0,5 ml di acqua deionizzata e mescolare bene;

3) Prendere 50 μl di analisi.

Rapporto di diluizione del campione: 10 Limite inferiore di rilevazione: 0,3 pppb

5.3.4 Metodi di trattamento per mangimi di olio commestibile, arachidi e grassi ricchi

1) Pesare 2 g di campione schiacciato in un tubo centrifugo da 50 ml, aggiungere 8 ml di n-esano e 10 ml di soluzione di estrazione del campione, agitare per 5 minuti, 4000 giri al minuto a temperatura ambiente/10 minuti del centro di separazione;

2) Rimuovere il liquido superiore, prendere 0,5 ml del liquido inferiore e aggiungere 0,5 ml di acqua deionizzata, mescolare bene, quindi prendere 0,5 ml del liquido misto e aggiungere 0,5 ml di metanolo al 35%, agitare per 30 secondi;

3) Prendere 50 μl di analisi.

Rapporto di diluizione del campione: 20 Limite inferiore di rilevazione: 0,6 pppb

5.3.5 Alimenti o condimenti quali salse, grano, biscotti, dolci e metodi di trasformazione dei mangimi come il concentrato per mangimi

1) Pesare 2 g di campione schiacciato in un tubo centrifugo da 50 ml, aggiungere 10 ml di soluzione di estrazione del campione, agitare per 5 minuti, a 4000 giri al minuto a temperatura ambiente/10 minuti di centro di separazione;

2) Prendere 2 ml di supernatante, aggiungere 4 ml di triclorometano (o diclorometano), agitare per 5 minuti, 4000 giri al minuto a temperatura ambiente/10 minuti di centro di separazione;

3) Trasferire il liquido superiore in un altro contenitore, lasciare il liquido inferiore in standby, aggiungere altri 4 ml di cloroformo (o diclorometano) al liquido superiore, agitare completamente e mescolare per 5 minuti,e la temperatura ambiente è di 4000 rpm/centro di separazione per 10 minuti;

4) Rimuovere il liquido superiore, mescolare due volte il liquido inferiore e mescolare completamente;

5) Prendere 2 ml del liquido inferiore combinato e soffiarlo a secco a 50-60 °C di azoto;

6) Aggiungere 0,5 ml di estratto di campione per dissolvere completamente la sostanza secca e quindi aggiungere 0,5 ml di acqua deionizzata per mescolare;

7) Prendi 50 μl di analisi.

Rapporto di diluizione del campione: 10 Limite inferiore di rilevazione: 0,3 pppb

5.3.6 Metodo di trasformazione della birra

1) Mescolare completamente la birra (rimuovere la CO2), prelevare 2 ml di campione di birra, aggiungere 1 ml di acqua distillata, aggiungere 7 ml di metanolo e agitare per 5 minuti;

2) Prendere 0,5 ml di soluzione miscelata del campione e aggiungere 0,5 ml di acqua deionizzata per mescolare bene;

3) Prendere 50 μl di analisi.

Rapporto di diluizione del campione: 10 Limite inferiore di rilevazione: 0,3 pppb

5.3.7 Metodo di trattamento di vino, salsa di soia e aceto

1) Prendere 2 ml di campione, aggiungere 2 ml di acqua distillata, aggiungere 10 ml di triclorometano (o diclorometano), agitare per 5 minuti, 4000 giri al minuto a temperatura ambiente/10 minuti di centro di separazione;

2) Prendete 1 ml del liquido inferiore e soffiatelo a secco a 50-60 °C di azoto;

3) Aggiungere 0,5 ml di estratto di campione per dissolvere completamente la sostanza secca, quindi aggiungere 0,5 ml di acqua deionizzata e mescolare bene;

5) Prendere 50 μl di analisi.

Rapporto di diluizione del campione: 5 Limite inferiore di rilevazione: 0,15 pppb

6 fasi dell'ELISA

Prendere il reagente richiesto dall'ambiente di conservazione a freddo a 4 °C e posizionarlo a temperatura ambiente per più di 30 minuti.Potrebbero esserci cristalli che devono essere riportati a temperatura ambiente per dissolversi completamente quando la soluzione di lavaggio è conservata a freddo. Ogni reagente liquido deve essere agitato prima dell'uso. Rimuovere il numero richiesto di piastre e cornici microporose, mettere le piastre microporose non utilizzate in sacchetti auto sigillabili e conservarle a 2-8 °C.

Prima dell'esperimento, 20 × La soluzione di lavaggio concentrata viene diluita in soluzione di lavaggio di lavoro per 20 volte.

6.1 Numerazione: numerare in sequenza i pozzi corrispondenti del campione e dello standard, fare due fori paralleli per ciascun campione e standard e registrare la posizione del buco standard e del buco del campione.

6.2 Reazione di aggiunta del campione: aggiungere 50 μl/pozzo di campione standard o campione nei rispettivi pozzi, quindi aggiungere 50 μl/pozzo di marcatore enzimatico, quindi aggiungere 50 μl/pozzo di soluzione di lavoro di anticorpi,sigillare la piastra con una membrana della piastra di copertura, agitare delicatamente per 5 secondi, mescolare e reagire a 25 °C per 30 minuti.

6.3 Lavaggio: rimuovere con attenzione la membrana della piastra di copertura, asciugare il liquido nel foro, lavare completamente il foro con una soluzione di lavaggio di lavoro di 250 μl/foro per 5 volte, con un intervallo di 30 secondi,e tamponarlo asciutto con carta assorbente (le bolle che non vengono rimosse dopo la tamponatura possono essere perforate con una testa di pistola pulita).

6.4 Sviluppo del colore: aggiungere a ciascun foro 50 μl di soluzione di substrato A e 50 μl di soluzione di substrato B, agitare delicatamente per 5 secondi e mescolare bene, e sviluppare il colore al buio a 25 °C per 15 minuti.

6.5 Terminazione: aggiungere 50 μl di soluzione terminale a ciascun foro, agitare delicatamente e mescolare bene per terminare la reazione.

6.6 Misurazione del valore di assorbimento: utilizzare il misuratore di aflatossine per misurare il valore di assorbimento di ciascun foro a 450 nm (si raccomanda una doppia lunghezza d'onda 450/630 nm).La determinazione deve essere completata entro 10 minuti dal termine della reazione.

6.7 Il misuratore automatico di aflatossine ST-2000A completa automaticamente la determinazione e fornisce automaticamente i risultati.